期刊简介

  本刊于1992年创刊,原为季刊,从1999年起改为双月刊。2001年改版为大16开版本。它是一本综合性的眼科专业期刊,共有研究临床、实验研究、基础研究、综述、防盲治盲、学术动态、经验介绍、专题笔谈、诊疗新技术、病例报告等栏目。从2001年起增辟专家述评、争鸣园地、眼科技术创新和眼科疾病治疗经验介绍和眼科再教育栏目,近期为配合中级技术职称晋升,刊登眼科试题及参考答案旨为帮助应试者复习。

         

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  • 杂志名称:眼科杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中日友好医院,北京同仁医院,北京市眼科研究所
  • 国际刊号:1004-4469
  • 国内刊号:11-3025/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:1998年获河南省科技期刊三等奖期刊收录:万方收录(中), CA 化学文摘(美), 知网收录(中)
眼科杂志2005年第03期

角膜缘干细胞克隆化培养影响因素的研究

王颖;潘志强;张文华;武宇影;接英

关键词:角膜缘干细胞, 饲细胞, 体外培养
摘要:目的探讨丝裂霉素C处理Swiss-3T3成纤维细胞作为饲细胞的条件,了解兔角膜缘于细胞克隆化培养的增殖状况.设计对照实验研究.研究对象兔角膜缘干细胞单纯培养组,兔角膜缘干细胞与Swiss-3T3成纤维细胞作为饲细胞的混合培养组.方法采用DMEM/F12培养基进行细胞培养,观察4.0μμg/ml丝裂霉素C作用不同时间后3T3细胞数量的变化.DispaseⅡ酶消化兔角膜缘上皮细胞,与饲细胞混合接种,观察干细胞克隆形成情况,比较各代、各组的细胞克隆形成率(CFE).用EDTA去除饲细胞,间接免疫荧光染色检测角膜缘干细胞克隆团表达增殖细胞核抗原(PCNA)情况.主要指标细胞数/毫升,细胞克隆形成率.结果4.0μg/ml丝裂霉素C处理2.5小时的Swiss-3T3细胞,培养期间(约12日)细胞数量无明显变化,可作为饲细胞.与饲细胞共同培养的兔角膜缘干细胞形成细胞克隆团,细胞的平均CFE比较:有饲细胞组角膜缘干细胞明显高于无饲细胞组(t=2.982,P<0.01).兔角膜缘干细胞冻存复苏后平均CFE比较,有饲细胞组明显高于无饲细胞组(t=3.007,P<0.01).兔角膜缘干细胞克隆团中细胞PCNA染色为阳性.结论角膜缘干细胞与作为饲细胞的Swiss-3T3成纤维细胞共同培养形成细胞克隆,其中含有干细胞,且具有高增殖力.